猫如何检查杯状病毒?
目前尚无诊断杯状病毒的金标准,临床常用血清学方法检测抗体来确诊,而病毒分离鉴定、核酸检测等用于确认感染源和流行病学关联研究。 (一)血清学试验 间接血凝(IHA)和ELISA法是最常用的检测抗体的方法,此外还有免疫荧光技术(IFAT)。
1.间接血凝 间接血凝是鉴定新发病病例是否患有杯状病毒病的敏感而特异性强的方法。早期应用IHA检测抗体时,采用鸡红细胞作为凝集剂,由于鸡的红细胞能被猫的淋巴细胞特异识别,故可观察到特异性凝集反应。随着研究的深入,发现这种反应的抗原性并不强,存在种属特异性的问题;另外,使用鸡红细胞作载体,操作过程中可能携带人血清蛋白,给结果带来假阳性或假阴性。目前多改用ELISA法检测抗体。
2.ELISA ELISA是应用酶标记物检测抗体的免疫化学方法。将已知的抗体结合物(包被用)加到酶标板孔内,再与待测标本(被检血清)相互作用,形成的复合物经酶标记的抗体显色,根据颜色深浅判断抗体水平。与IHA相比,该方法敏感性更高,更适用于大量样品的初筛。但ELISA也存在不能绝对区分血清中IgM和IgG类抗体的不足之处。认为血清中检测到杯状病毒抗体即可确诊患杯状病毒病这一观点欠妥当。
3.其他检测手段 除了检测抗体外,还可应用病毒分离培养、核酸分子探针技术和PCR等技术检测有无杯状病毒感染的证据。病毒分离培养需时较长(约10天),不适于急诊送检样例的处理,目前已较少应用;而在鉴别疑似病例标本中所含病毒的类型方面,这些技术的应用具有重要作用。对于难以确定感染的动物可使用核酸探针技术进行检测,若为阳性则可证实有病毒复制;对急性或亚急性病例应及时采集病料并行RT-PCR扩增,检出相关病原体核酸序列,以进一步确定病因。
(二)组织病理学检查 对疑似杯状病毒病死亡的动物可进行病理组织学检查。光镜下可见呼吸道黏膜上皮细胞和消化道黏膜上皮细胞的严重损伤和脱落,表面覆盖着由黏液组成的透明膜;电镜下可见核内和胞质内聚集的大量病毒颗粒,病毒粒子形状多为球形或卵圆形,有的呈折叠状,与冠状病毒科病毒的一般形态特征相符。